農業人才網

2008.10.—2009.6. 載體改造與構建， 大豆遺傳轉化與組織培養
熟悉各種載體構建的流程及相應的載體圖譜，構建基因重組載體（替換篩選標記的載體構建和增加GUS瞬時表達的載體構建），轉化大腸桿菌，進而轉化農桿菌，并對轉化成功的載體進行驗證。獲得目的菌株進行大豆子葉節的遺傳轉化，通過組織培養技術獲得轉基因植株。
2009.06—2011.03  擬南芥AtNHX5基因的載體改造、轉化大豆及功能驗證
構建AtNHX5基因的植物重組表達載體，凍融法轉化農桿菌。農桿菌轉化大豆子葉節法轉化大豆，經過抗性篩選，PCR檢測，southern 雜交和RT-PCR等技術檢測方法證明獲得轉基因大豆。并對后代轉基因大豆進行抗逆性的鑒定，并對植株中脯氨酸、丙二醛及離子含量等生理指標進行了檢測，鑒定基因功能。
2011.06—2011.09 SSH抑制消減雜交文庫的構建及電子克隆基因
查閱文獻了解SSH抑制消減雜交文庫的構建流程， 獨立進行整個實驗的操作摸索。提取處理后的大豆節的RNA,翻轉錄CDNA ,RsaI酶切后連接接頭，進行2次雜交，2次PCR后，連接載體轉化大腸桿菌，進行序列分析。最終獲得與再生相關基因的克隆。同時利用電子克隆的方式獲得與再生相關基因的克隆。