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    中國轉基因在棉花領域研發應用的二十年

    2015-9-19 農業人才網
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    1.4抗病轉基因棉花

    棉花病害是影響棉花生產的主要因素之一,目前困擾中國棉花產業的主要病害是黃萎病,棉花黃萎病是黃萎病菌經土壤傳播、侵染到棉花植株最終引發維管束疾病的一種真菌性病害,具有危害嚴重、分布范圍大、寄主種類多及存活時間長等特點,可造成棉花大量減產甚至絕收,被形象地稱為棉花的“癌癥”。針對以黃萎病為代表的主要病害,采用傳統的防治手段,如通過傳統育種的方法培育抗病品種、農藥防治等方法收效甚微,而且存在培育周期長,嚴重污染環境等問題,因此,近年來中國研究人員從生物技術的角度,對抗棉花黃萎病基因開展了大量的研究,并取得了重要進展。

    高巍以海島棉品種海7124作為研究材料,通過比較蛋白質組學的方法,一共得到188個在海7124根系中受黃萎病菌侵染后與水處理的平行對照相比表達量出現差異的蛋白,這些蛋白共同參與了棉花對黃萎病菌入侵的響應。徐理分別構建了抗黃萎病的海島棉海7124接種黃萎病菌后的抑制差減雜交cDNA文庫以及通過大規模測序的RNA-Seq技術研究棉花抗黃萎病機制,通過基因表達分析,獲得了大批棉花抗黃萎病相關基因,并對其中的一個WRKY類轉錄因子進行了較為詳細的功能。孟憲鵬克隆得到2個海島棉ERF轉錄因子基因,將其轉化植物后對其抗病相關功能進行研究,結果表明,在轉基因煙草中,海島棉ERF轉錄因子可以增強煙草PR基因的表達;在轉基因棉花中,可以增強幾丁質酶基因、β-1,3-葡聚糖酶基因和PR基因等棉花抗病相關基因的表達。由此推測,將海島棉ERF基因轉入棉花超表達后能夠高效激活下游抗病相關基因的表達。通過對已得到的轉基因棉花部分幼苗進行黃萎病菌侵染后發現:T0轉EREB1棉花幼苗的耐病能力高于對照。通過上述研究可知:海島棉ERF族基因的新成員EREB1/2在調控抗病相關基因表達方面具有重要作用,EREB1/2在轉基因煙草和棉花中超表達后可有效增強植株體內抗病相關基因的表達,從而提高了轉基因植株的抗病能力。張文蔚以陸地棉高抗黃萎病新品系中植棉KV1為材料,接種大麗輪枝菌強致病力落葉型菌株V991后0—96h棉株幼根總RNA,構建正、反向抑制差減雜交文庫,篩選到147個信號強度差異明顯的克隆,建立了黃萎病菌侵染初期陸地棉的抗病相關基因表達譜,并證明了GhUbI1、GhEG和GhSCF在陸地棉抗黃萎病的過程中起重要作用。趙付安采用SSH技術從轉錄組水平探討了陸地棉基因的差異表達,采用2-DE技術從蛋白質組水平探討了栽培棉近緣野生種瑟伯氏棉的蛋白差異表達,并以此為基礎克隆了2個陸地棉結構抗性基因GhDIR和GhSUMO,克隆了瑟伯氏棉根的GPIP,克隆了瑟伯氏棉根的4個TIR-NBS-LRR類抗病基因類似物,這七個基因的克隆為進一步研究其抗病功能奠定了基礎。倪萌等采用葉片針刺接種法從細胞學方面分析轉hpa1xoo棉花與棉花黃萎病菌互作產生的微過敏抗病反應,通過細胞顯微觀察表明,轉hpa1xoo棉花T-34與非轉基因棉花在抗病性表型方面存在明顯差異,轉hpa1xoo棉花較非轉基因棉花有較強的抗病性。

     

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